1 诊断制品名称

通用名：猪瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒

商品名：无

英文名：Classical Swine Fever Virus Indirect ELISA Antibody Test Kit

汉语拼音：Zhuwen Bingdu Jianjie ELISA Kangti Jiance Shijihe

命名依据：依据《兽用生物制品通用名命名指导原则》3.5.3，抗体检测试剂盒采用"微生物名＋试验名称＋抗体检测试剂盒"形式命名。

2 证明性文件

（1）申请人合法登记证明文件复印件（企业营业执照等，加盖公章）。

（2）知识产权不侵权保证书。

（3）涉及一类病原微生物使用的，提供官方审批/许可文件复印件；未使用者出具未使用说明。

〖申请人自有材料：以上证明性文件由申请人提供，agent 不代拟/不伪造〗

3 技术标准全套文件

3.1 猪瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒质量标准

猪瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒

Zhuwen Bingdu Jianjie ELISA Kangti Jiance Shijihe

Classical Swine Fever Virus Indirect ELISA Antibody Test Kit

本品系用纯化的猪瘟病毒E2重组蛋白制备抗原包被板，与阳性对照血清、阴性对照血清、样品稀释液、20×洗涤液、HRP标记兔抗猪IgG、HRP标记兔抗猪IgG稀释液、底物溶液A、底物溶液B、终止液组装而成。用于检测猪血清中的猪瘟病毒抗体。

【立项必要性】 猪瘟（CSF）是世界动物卫生组织（WOAH/OIE）名录疫病，高度接触传染、高发病率与高死亡率，是危害最严重的猪病毒病之一^[文献1]。我国对猪瘟实行全国性强制免疫防控，大规模暴发少见、病原呈低流行（2022年全国20省/市689个猪场205,622份样品监测，病原样品阳性率仅0.25%、猪场阳性率5.08%^[文献3]），但每年仍有零星暴发^[文献2]。正是在"以普免为主、病原低流行"的格局下，防控成效不能再靠检出病原来判断，而必须依靠抗体水平监测——评估群体免疫覆盖率、识别免疫空白与免疫失败、为净化与退出免疫决策提供依据。因此对高通量、可量化的猪瘟抗体检测试剂盒存在明确且持续的需求〖建议申请人补充：国家猪瘟防控/净化方案中关于抗体监测的政策依据条款，以直接支撑本抗体盒立项〗。

【技术路线与亮点】 本品以重组E2糖蛋白为包被抗原建立间接ELISA。文献表明，基于E2的间接ELISA可获得与病毒中和试验（VNT）及商品化试剂盒高度一致的诊断性能：截短E2间接ELISA敏感性93.7%（119/127）、特异性92.3%（143/155），与VNT符合率92.9%、与IDEXX CSFV阻断ELISA符合率92.2%^[文献6]；另有研究以CSFV Erns为抗原建立间接ELISA（敏感性93.3%、特异性92.0%），可区分猪瘟与牛病毒性腹泻（BVDV）抗体，对鉴别诊断有参考价值^[文献5]。上述为文献方法学基准，本品的判定阈值与性能指标须以申请人自有标定/验证试验数据为准。

【安全性说明】 本品包被抗原为重组表达的猪瘟病毒E2糖蛋白，不含活病毒及具感染性的完整病原，生产与使用环节无活毒泄漏/散毒风险；阳性对照血清来源、灭活与生物安全状态见工艺规程〖申请人补：血清来源与生物安全声明〗。属体外诊断制品，不接种动物，无本动物安全性/毒力返强相关风险。

【有效性·平行关系（落到本品）】 本品在质量研究阶段须以自有阳性/阴性参考血清 panel，与病毒中和试验（VNT）及/或商品化阻断ELISA（如 IDEXX CSFV Ab）进行平行比对，统计相对敏感性、相对特异性与总符合率，确立本品与金标准/参比方法的平行关系〖符合率判定值：申请人标定自有数据〗。文献中同类E2方法与VNT/IDEXX符合率约92%～93%（见上）仅作可达性参照。

【性状】 试剂盒包装应完好，组分齐全，无破损，无渗漏。其中抗原包被板包装袋封闭良好，孔底清洁透明，无异物；阳性/阴性对照血清为澄清液体；底物溶液A、B为无色透明液体；终止液为无色透明液体。

【无菌检验】 按现行《中国兽药典》三部附录进行检验，阳性对照血清、阴性对照血清均应无菌生长。

【敏感性检验】 将敏感性质控血清（阳性对照血清用阴性对照血清梯度稀释）按说明书"用法与判定"项检测，各梯度检出结果应满足〖判定梯度与阈值：申请人标定自有数据〗（同类E2方法敏感性文献值约93.3%～93.7%仅作立项参照，不作验收线）。

【特异性检验】 按说明书"用法与判定"项检测特异性质控血清（猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病病毒等阳性血清及健康猪血清），每份特异性质控血清的P%值均应低于〖判定阈值：申请人标定自有数据〗（同类E2方法特异性文献值约92%～92.3%仅作立项参照，不作验收线）。

【重复性检验】 取同一质控血清，同批内多孔重复检测、不同批次间重复检测，批内变异系数（CV）与批间变异系数应分别不高于〖判定阈值：申请人标定自有数据〗。（依官方兽医诊断制品三要素：敏感性/特异性/重复性，本项为必备。）

3.2 猪瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒工艺规程

【概述】 本品系用纯化的猪瘟病毒E2重组糖蛋白包被酶标板制成抗原包被板，与阳性对照血清、阴性对照血清、样品稀释液、20×洗涤液、HRP标记兔抗猪IgG及其稀释液、底物显色液（A、B）、终止液、血清稀释板等组装成间接ELISA抗体检测试剂盒，用于检测猪血清中的猪瘟病毒抗体。本规程规定本品的制造与检验要求。

1 制造抗原/抗体用菌毒种和细胞标准

1.1 抗原表达用工程菌/细胞 制造本品包被抗原（猪瘟病毒E2重组糖蛋白）所用的表达体系为〖申请人自有数据：表达载体/工程菌株或细胞系名称、来源、保藏编号〗，由〖申请人自有数据：保藏/供应单位〗鉴定、保存与供应。代次要求：菌种传代不超过3代、生产用细胞不超过20代〖申请人自有数据：实际代次记录〗。

1.2 对照血清来源用毒（抗原） 阳性对照血清系以〖申请人自有数据：免疫用猪瘟抗原/疫苗及其株名、来源〗免疫健康易感猪（猪瘟病毒抗体阴性）制备；阴性对照血清取自经检测为猪瘟病毒抗体阴性的健康猪。相关生物安全声明见证明性文件。

1.3 种子保存 〖申请人自有数据：2~8℃或–20℃以下保存条件与保存期〗。

2 各组分制备与检验

2.1 抗原包被板的制备及检验

2.1.1 E2重组抗原的表达与纯化 按〖申请人自有数据：表达诱导、收获、纯化（亲和层析等）工艺参数〗制备纯化的猪瘟病毒E2重组糖蛋白。纯度测定应不低于〖申请人自有数据：纯度标准，如≥90%〗；蛋白含量〖申请人自有数据〗。

2.1.2 抗原包被板的制备 以包被缓冲液（0.05mol/L碳酸盐缓冲液，pH值9.6）将E2抗原稀释至〖申请人自有数据：包被浓度，如10μg/ml〗，加入酶标板，每孔100μl，2~8℃包被16小时。以1×洗涤液洗涤1次，每孔加封闭液（含5%脱脂奶粉的0.01mol/L、pH7.4的PBS）200μl，2~8℃封闭24小时。以1×洗涤液洗涤3次，拍干、风干，铝箔袋真空包装。

2.1.3 抗原效价测定 将包被抗原作1：25、1：50、1：100、1：200系列稀释包被酶标板，以阳性对照血清和阴性对照血清为参照进行间接ELISA检测，以阳性对照OD450nm在0.8~2.5、阴性对照OD450nm＜0.2 的抗原最大稀释度作为抗原ELISA效价，应不低于〖申请人自有数据：效价标准，如1：100〗。

2.1.4 抗原包被板的检验 包装袋封闭良好，孔底清洁透明，无异物。

2.1.5 保存 2~8℃保存，保存期为〖申请人自有数据，如12个月〗。

2.2 阳性对照血清的制备与检验 免疫健康猪（猪瘟抗体阴性）制备，分离血清，用阴性对照血清稀释至规定效价，加 proclin 300 至终浓度0.05%，–20℃或2~8℃保存。检验：性状为澄清液体；无菌检验按现行《中国兽药典》三部附录应无菌生长；效价/P%判定〖申请人自有数据〗。

2.3 阴性对照血清的制备与检验 取猪瘟病毒抗体阴性健康猪血清，过滤除菌，加 proclin 300 防腐，无菌分装。检验：性状澄清；无菌生长；间接ELISA OD450nm＜〖申请人自有数据，如0.2〗。

2.4 20×洗涤液的配制及检验 按磷酸盐+NaCl+Tween-20 配方配制（pH7.2~7.6），分装。检验：无色透明液体（低温可结晶，37℃水浴溶解）；保存期〖申请人自有数据〗。

2.5 样品稀释液的配制及检验 磷酸盐缓冲体系含海藻糖、Tween-20 及蓝色指示色素，加 proclin 300 至0.05%，过滤除菌分装。检验：蓝色澄明液体。

2.6 HRP标记兔抗猪IgG及其稀释液的配制及检验 将商品化 HRP标记兔抗猪IgG 用稀释液作适当稀释（如1：300），加 proclin 300 防腐，无菌分装。检验：黄色澄明液体；工作浓度〖申请人自有数据〗。

2.7 底物显色液与终止液 底物溶液A、B为商品化TMB体系，棕色瓶装无色透明液体；终止液为1mol/L HCl，无色透明液体。

3 组装

3.1 试剂盒组装 将抗原包被板、阳性对照血清、阴性对照血清、样品稀释液、20×洗涤液、HRP标记兔抗猪IgG及其稀释液、底物溶液A/B、终止液、血清稀释板及说明书按规格组装（见说明书【主要成分与含量】）。

4 成品出厂检验

4.1 性状 试剂盒包装完好，组分齐全，无破损、无渗漏；各组分性状符合各自规定。

4.2 无菌检验 按现行《中国兽药典》三部附录进行检验，阳性对照血清、阴性对照血清应无菌生长。

4.3 敏感性检验 将敏感性质控血清（P1、P2、P3、P4）按说明书"用法与判定"项检测，P%梯度应满足〖申请人自有数据：各梯度P%判定区间〗。

4.4 特异性检验 将特异性质控血清（N1~N5：猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病等异源抗体阳性血清及健康猪血清）按说明书检测，每份P%均应低于〖申请人自有数据，如30%〗。

4.5 重复性检验 批内/批间变异系数应不高于〖申请人自有数据〗。

5 附注

附注1~6 各质控血清（敏感性质控血清P1~P4、特异性质控血清N1~N5）的制备、检验与标定方法详见"三、质控样品研究资料"。〖申请人自有数据：各质控血清的标定值〗

3.3 说明书和标签文字样稿

3.3.1 猪瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒说明书

兽用

【兽药名称】

通用名：猪瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒

商品名：无

英文名：Classical Swine Fever Virus Indirect ELISA Antibody Test Kit

汉语拼音：Zhuwen Bingdu Jianjie ELISA Kangti Jiance Shijihe

【主要成分与含量】

【性状】 试剂盒包装完好，组分齐全；抗原包被板孔底清洁透明；对照血清为澄清液体；底物溶液A、B及终止液为无色透明液体。

【作用与用途】 用于检测猪血清中的猪瘟病毒抗体。

【用法与判定】

1 用法

1.1 样品处理 取猪全血，待血液凝固后，以4000转/分钟离心10分钟，收集上清，血清应清亮，无溶血。

1.2 1×洗涤液的配制 使用前将20×洗涤液恢复至室温（20~25℃）摇匀（可37℃水浴溶解结晶），用去离子水作1：20稀释，充分混匀。

1.3 待检血清和对照血清的稀释 在血清稀释板中将待检血清、阴性对照血清和阳性对照血清用样品稀释液作1：50稀释。

1.4 操作步骤

1.4.1 加样 取抗原包被板，以1×洗涤液300μl/孔洗板1次。将稀释好的待检血清、阳性对照血清、阴性对照血清加入ELISA板，100μl/孔，阳/阴性对照各加2孔。37℃作用30分钟，弃液，1×洗涤液300μl/孔洗涤3次，拍干。

1.4.2 加酶标抗体 将HRP标记兔抗猪IgG用其稀释液作1：100稀释，每孔100μl，37℃作用30分钟，洗涤3次，甩干。

1.4.3 显色与终止 底物溶液A、B按1：1（V/V）混合，立即加入100μl/孔，37℃避光显色15分钟，每孔加50µl终止液终止反应。

2 结果判定 反应终止后15分钟内用酶标仪测定OD450nm值。

2.1 计算方法 阳性百分比 P% =（样本平均OD450nm值 / 阳性对照平均OD450nm值）×100%。

2.2 实验成立条件 阳性对照平均OD450nm应为0.8≤OD450nm＜2.5，阴性对照平均OD450nm＜0.2，实验成立。

2.3 结果判定 当血清样本P%值 ≥本品标定阈值时判为猪瘟病毒抗体阳性；＜该阈值时判为阴性。阳性判定阈值的确定可参照现行国家标准 GB/T 35906—2018《猪瘟抗体间接ELISA检测方法》的判定原理［来源B-GB1，同类国标方法参照］，但具体临界值（P%）须由申请人以本品阴/阳性参考血清 panel 实测标定，本系统未检索到可逐字引用的公开同类临界数值，依反幻觉守则不预填具体百分数。〖判定阈值：申请人标定自有数据〗

【不良反应】 本品为体外诊断制品，不接种动物，无不良反应（诊断制品不适用项）。

【注意事项】 （1）严格按说明书操作，不同批号组分不得混用。（2）所有试剂于2~8℃保存，使用前室温平衡15~30分钟，抗原包被板开封未用完应装入密封袋保存。（3）血清稀释板只能使用1次。（4）加样避免起泡及溅出，防止样本间污染。（5）底物溶液避光保存，避免接触氧化剂。（6）终止液为1mol/L HCl，有腐蚀性，避免接触眼睛和皮肤。

【规格】 （1）96孔/盒 （2）192孔/盒 （3）480孔/盒 （4）960孔/盒

【包装】 铝箔袋/塑料瓶/西林管分装，纸盒包装，每盒附说明书1份。

【贮藏与有效期】 2~8℃保存，有效期为〖申请人自有数据：经稳定性试验确定，如12个月〗。

【批准文号】 〖待批准后填写〗

【生产企业】 〖申请人填写：企业名称、地址、联系方式〗

仅供兽医诊断使用

3.3.2 猪瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒内包装标签

兽用

猪瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒

96（192、480、960）孔/盒

批准文号：〖待批准后填写〗

批　　号：〖生产时填写〗

生产日期/有效期至：〖生产时填写，2~8℃有效期如12个月〗

【用法与判定】 详见说明书。

【贮藏与有效期】 2~8℃保存，有效期为〖申请人自有数据，如12个月〗。

【生产企业】 〖申请人填写〗

仅供兽医诊断使用

（本章对版骆驼范本"生产工艺研究资料"结构，记录工艺的确立与验证过程；具体工艺参数与验证数据为申请人自有实测数据，留占位。）

1 抗原（猪瘟E2重组糖蛋白）生产工艺研究

1.1 表达体系的构建与筛选 〖申请人自有数据：E2基因来源株、密码子优化、表达载体、宿主（大肠杆菌/杆状病毒-昆虫细胞/哺乳细胞）、阳性克隆筛选过程〗。

1.2 表达与纯化工艺 诱导表达条件、收获、裂解、亲和层析/离子交换纯化各步参数及收率〖申请人自有数据〗。

1.3 抗原鉴定 SDS-PAGE/Western blot 分子量与反应性、纯度（应≥〖占位，如90%〗）、蛋白含量测定方法与结果〖申请人自有数据〗。

2 包被与封闭工艺研究

包被抗原浓度、包被温度时间、封闭液配方与条件、洗涤次数等关键参数的优化（方阵滴定确定最佳包被浓度与血清/酶标抗体稀释度）〖申请人自有数据：方阵滴定结果表〗。

3 对照血清与质控血清制备工艺研究

阳性/阴性对照血清的来源猪、免疫/采血方案、效价标定；敏感性质控血清梯度稀释方案、特异性质控血清异源抗原选择（PRRSV、PCV2、PRV 等）〖申请人自有数据〗。

4 工艺验证

应以连续3批中试验证工艺稳定性与组分一致性，并支撑重复性（至少3批批间/批内）与保存期（至少3批成品）研究［来源A2 重复性/保存期研究、来源A1 中试连续3批，逐字］〖申请人自有数据：3批工艺验证实测数据〗。

（对版骆驼范本"质控样品研究资料"。质控品的制备、检验、标定为申请人自有实测数据。）

1 阳性对照血清（标准/参考品）

制备来源、试管凝集/中和效价标定、间接ELISA OD450nm 与 P% 标定值、均一性与稳定性〖申请人自有数据〗。

2 阴性对照血清

来源筛查（VNT/商品盒确认阴性）、OD450nm 上限标定〖申请人自有数据〗。

3 敏感性质控血清 P1~P4

由阳性对照血清梯度稀释制备，标定各梯度 P% 判定区间（对版骆驼范本梯度设计：P1 70%≤P%＜90%、P2 50%≤P%＜70%、P3 30%≤P%＜50%、P4 P%＜30%，本品具体区间以申请人标定为准）〖申请人自有数据〗。

4 特异性质控血清 N1~N5

分别以猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病病毒等异源抗体阳性血清及健康猪阴性血清制备，标定每份 P%＜判定阈值〖申请人自有数据〗。

（对版骆驼范本"制品质量研究资料"。本章为核心有效性证据，须以申请人自有验证数据支撑；文献值仅作可达性参照，不作验收线。）

1 敏感性研究

（官方必备项①）以系列稀释阳性参考血清/临床确诊阳性血清 panel 测定阳性检出率与最低检出量（灵敏度）及相对敏感性〖申请人自有数据：样本量、相对敏感性%、95%CI〗。拟定可达性目标（参照同类重组E2间接ELISA文献区间，待本品实测验证）：相对敏感性约93.3%~93.7%^[文献5]——仅为可达性参照，不作本品验收线。

2 特异性研究

（官方必备项②）以已知阴性样品 + 可能交叉反应的异源病原抗体阳性血清（PRRSV、PCV2、PRV，必要时含 BVDV）及健康猪血清测定相对特异性与交叉反应〖申请人自有数据：相对特异性%、交叉反应结果〗。拟定可达性目标（参照同类方法文献区间，待本品实测验证）：相对特异性约92.0%~92.3%^[文献5]，并可区分 CSFV 与 BVDV 抗体^[文献5]——仅作参照，不作验收线。

3 重复性/再现性研究

（官方必备项③）须提供至少3批制品的批内、批间变异系数（CV）研究报告，并可补充实验室间再现性〖申请人自有数据：各批批内/批间 CV〗。判定限值（CV 上限）由申请人据自有重复性数据标定（本系统未检索到可逐字引用的公开同类限值，依反幻觉守则不臆造具体百分数）。

4 与参比方法的符合性研究

以 VNT 及/或商品化阻断ELISA（如 IDEXX CSFV Ab）为参比，统计阳性符合率、阴性符合率、总符合率与 Kappa 值〖申请人自有数据〗。判定方法学可参照现行国家标准 GB/T 35906—2018《猪瘟抗体间接ELISA检测方法》及 GB/T 34729—2017《猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测方法》［来源B-GB1、B-GB2，同类国标方法参照］。拟定可达性目标（待本品实测验证）：与VNT符合率约92.9%、与IDEXX约92.2%^[文献6]，仅作参照。

5 稳定性研究

（官方必备项④）须以至少3批成品做效期稳定性（2~8℃）与加速/热稳定性试验，据以确定有效期［来源A2 保存期试验逐字］〖申请人自有数据：3批稳定性试验数据；有效期最终值由本品实测确定〗。

（对版骆驼范本"中试生产及临床试验报告"。中试与临床为申请人自有实测数据。依《兽用诊断制品注册资料要求》《体外兽医诊断制品注册资料要求》，临床样本量需满足官方门槛。）

1 中试生产

应在申请人自有 GMP 生产线连续生产3批中试制品，附各批成品出厂检验报告及中试问题与解决措施［来源A1，公告342/review_standards.json：「申请人自有GMP生产线连续3批，附检验报告与中试问题及解决措施」；与来源A2「连续3批制品检验报告」一致］。各批成品出厂检验结果与批间一致性〖申请人自有数据：3批中试实测数据〗。

2 临床试验

2.1 试验设计 多地区临床样本采集，与参比方法（VNT/商品盒）平行检测。官方强制量化门槛（必须满足）：①样品数量——靶动物（猪）临床样品检测数量应不少于500份［来源A2，逐字］（犬猫等宠物≥200份、难获得的动物疫病临床样品≥50份，本品靶动物为猪，故按≥500份执行）；②交叉确认——至少10%的临床样品（含阴、阳性样品）检测结果须用其他方法确认［来源A2，逐字］，其中阳性样品比例应≥50%［来源A1（公告342附件2），见 review_standards.json 临床试验量化门槛］；③批数——应使用至少3批合格中试制品开展临床试验［来源A2，逐字］。覆盖阳性与阴性、多场多地区，须报告所有不符合预期的试验数据［来源A1］。具体抽样方案、采样地区与场点由申请人确定。

2.2 临床结果 相对敏感性、相对特异性、总符合率、Kappa〖申请人自有数据：临床检测结果汇总表〗。

2.3 结论 本品临床检测性能与参比方法一致性良好〖以申请人实测结论为准〗。

参考文献

^[文献1]Classical Swine Fever in China—An Update Minireview. Frontiers in Veterinary Science, 2019. https://www.frontiersin.org/journals/veterinary-science/articles/10.3389/fvets.2019.00187/full （"CSF remains one of the most economically important viral diseases of domestic pigs and wild boar worldwide… an OIE-listed disease"）

^[文献2]同上（"Owing to a nationwide policy of vaccinations of pigs, CSF is well-controlled in China… Sporadic outbreaks are however still reported every year"）

^[文献3]Epidemiological analysis, risk factors, and spatial-temporal clustering of classical swine fever virus in China. Porcine Health Management, 2026. https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC12905922/ （"A total of 205,622 samples were collected from 689 pig farms… across 20 Chinese provinces/cities… sample level, the prevalence of CSFV was 0.25%… farm level… 5.08%"）【已WebFetch核验，原文逐字一致】

^[文献5]The recombinant Erns and truncated E2-based indirect ELISAs to distinguishably test antibodies against CSFV and BVDV. PMC9308313. https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC9308313/ （CSFV Erns-iELISA: sensitivity 93.3%, specificity 92.0%；可区分CSFV与BVDV抗体）【已WebFetch核验】

^[文献6]An improved indirect ELISA based on structurally designed E2 protein. PubMed 29572595. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29572595/ （truncated E2: sensitivity 93.7% (119/127), specificity 92.3% (143/155)；与VNT符合率92.9%、与IDEXX CSFV blocking ELISA符合率92.2%）【已WebFetch核验，逐字一致】

本次新增调研来源（判定标准/规范值）

［来源A1］中华人民共和国农业农村部公告 第342号（含附件《兽医诊断制品注册分类及注册资料要求》）. 中国政府网, 2020. https://www.gov.cn/zhengce/zhengceku/2020-10/14/content_5551145.htm （正文为公告与附件链接；本系统据其附件要求经 review_standards.json 固化的量化门槛：临床样品「每种靶动物≥500份；犬猫等宠物≥200份；难获得≥50份」「至少10%临床样品(含阴阳性，阳性比例≥50%)须用其他方法确认」「至少3批合格中试制品」「须报告所有不符合预期的试验数据」）【公告页已WebFetch；量化门槛细节以 review_standards.json 固化值为准，对应附件PDF】

［来源A2］《体外兽医诊断制品注册资料要求》（农业农村部畜牧兽医局，2024修订，公告于 moa.gov.cn）. 全文镜像：https://nyncw.cq.gov.cn/wsdw/cqsadc/tzgg_434151/202408/t20240805_13462977_wap.html ；发布页：https://www.moa.gov.cn/govpublic/xmsyj/202411/t20241101_6465505.htm （逐字：质量研究「敏感性研究：对已知弱阳性、阳性样品的阳性检出率，最低检出量（灵敏度）等」「特异性研究：对已知阴性样品、可能有交叉反应的抗原或抗体样品进行检测」「重复性研究：至少3批诊断制品的批间和批内可重复性研究报告」「保存期试验：至少3批诊断制品成品的保存期试验报告」；临床「每种靶动物临床样品检测数量应不少于500份」「至少10%的临床样品（含阴、阳性样品）检测结果需用其他方法确认」「使用至少3批制品开展临床试验」）【已WebFetch核验，逐字一致】

［来源B-GB1］GB/T 35906—2018《猪瘟抗体间接ELISA检测方法》（现行，2018实施）. 全国标准信息公共服务平台：https://std.samr.gov.cn/gb/search/gbDetailed?id=71F772D8281ED3A7E05397BE0A0AB82A （现行国家标准，同类间接ELISA判定方法学参照；用于免疫效果评价、疫病诊断、净化与流行病学调查）【已WebSearch核验存在与现行状态；其具体临界数值在公开页未逐字披露，故仅作方法学参照，未据以预填本品阈值】

［来源B-GB2］GB/T 34729—2017《猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测方法》（同类阻断法国标，作参比方法学参照）. 全国标准信息公共服务平台 https://std.samr.gov.cn/ 检索标准号可达【已WebSearch核验存在】

占位分桶说明（A官方强制值 / B同类参照拟定值 / C本品实测）

- A 官方强制规范值——已填实并标来源 6 处：①临床样品量门槛≥500份/靶动物（猪）［A2逐字］；②交叉确认≥10%（含阴阳性）且阳性比例≥50%［A2逐字+A1/review_standards］；③中试/临床至少3批合格制品［A1+A2逐字］；④质量研究四项必备（敏感性·特异性·重复性≥3批批间批内·保存期≥3批成品）［A2逐字，写入第四章及工艺验证］；⑤须报告所有不符合预期数据［A1］；⑥无菌检验按现行《中国兽药典》三部附录（沿用原稿，现行药典法定方法）。

- B 同类参照拟定值——已填 2 类、明确标「拟定/参照·待本品实测验证」：①敏感性/特异性/符合率可达区间（敏93.3%~93.7%、特92.0%~92.3%、符合率92.2%~92.9%）参照同类重组E2间接ELISA文献^[文献5]，写为「拟定可达性目标，待本品实测验证，不作验收线」；②判定方法学参照现行国标 GB/T 35906—2018 / GB/T 34729—2017［B-GB1、B-GB2 已核验存在］。未能填实的 B 项（依反幻觉铁律「查不到不填」保持占位）：抗原效价（如1：100）、抗原纯度（如≥90%）、阳性判定临界值 P%、有效期（如12个月）、重复性 CV 上限、阴性对照 OD 上限——经多轮 WebSearch/WebFetch 未检索到可逐字引用的公开同类质量标准具体数值（国标正文与兽药典 monograph 未公开披露具体限值），故一律保留为申请人自有/标定占位，绝不臆造。

- C 本品身份与实测结果——全部保留占位，agent 不填：本品判定阈值最终标定值、本品敏感性/特异性/符合率实测、本品临床结果、本品稳定性确定的有效期、批准文号、生产企业、表达体系/工艺参数等，均留 〖申请人自有数据／申请人标定／待批准后填写〗。

〖检索自检报告〗

- 本稿在已检索回填的"一般资料/质量标准"基础上，对版骆驼范本补全 工艺规程·说明书·标签 及 二~五章 结构。

- 反幻觉守则：文献数据仅作背景/方法学基准（可达性参照），未冒充本品实测；本品所有效价/纯度/阈值/符合率/样本量等实测数据一律标注"申请人自有数据"占位，agent 不臆造。

- 实测数据占位清单见各章 〖申请人自有数据〗 标记，交付时汇总为"申请人需补"清单。